Эмне көбүнчө ДНК клондоштуруу вектору болуп кызмат кылат?
Эмне көбүнчө ДНК клондоштуруу вектору болуп кызмат кылат?

Video: Эмне көбүнчө ДНК клондоштуруу вектору болуп кызмат кылат?

Video: Эмне көбүнчө ДНК клондоштуруу вектору болуп кызмат кылат?
Video: Динозаврлардын келип чыгышы | Тукум курут болгондукта... 2024, Декабрь
Anonim

көп түрлөрү бар векторлорду клондоо , бирок эң көп адатта колдонулгандары гендик инженерияланган плазмиддер. Клондоо көбүнчө биринчи ичеги таякчасынын жардамы менен жүргүзүлөт, жана векторлорду клондоо E. coliде плазмидалар, бактериофагдар (мисалы, фаг λ), космидалар жана бактериялык жасалма хромосомалар (БАК) кирет.

Ошондой эле, ДНК клондоштурууда вектор деген эмне?

Молекулярдык клондоо , а вектор болуп саналат ДНК Молекула бөтөн генетикалык материалды башка клеткага жасалма жол менен алып өтүү үчүн каражат катары колдонулат, ал жерде аны репликациялоого жана/же экспрессиялоого болот (мисалы, плазмида, космид, ламбда фагдары). А вектор чет өлкөлүк камтылган ДНК рекомбинант деп аталат ДНК.

Ошондой эле билиңиз, векторду кантип клондосоңуз болот? Эксперименттик процедура

  1. ПТРди иштетиңиз жана ПТР продуктуну тазалаңыз: Кыстаруу ДНКңызды күчөтүү үчүн ПТРди иштетиңиз.
  2. ДНКңызды сиңирүү:
  3. Гель менен тазалоо аркылуу векторуңузду жана векторуңузду изоляциялаңыз:
  4. Кыстармаңызды векторуңузга байлаңыз:
  5. Трансформация:
  6. Даяр плазмидди изоляциялоо:
  7. Плазмидиңизди секвенирлөө аркылуу текшериңиз:

Бул жагынан алганда, pBR322 клондоо вектору катары кантип иштейт?

pBR322 Плазмид pBR322 максатында колдонулган алгачкы плазмиддердин бири болгон клондоо . Анда тетрациклин менен ампициллинге туруштук берүүчү гендер бар. Белгилүү чектөө жерлерине ДНКны киргизүү болот тетрациклиндин генин (инсерциялык инактивация катары белгилүү болгон эффект) же ампициллинге туруктуулукту инактивациялоо.

Кайсы техника ДНКнын белгилүү бир бөлүгүнүн көптөгөн копияларын абдан ылдам жасоого мүмкүндүк берет?

Полимераздык чынжыр реакциясы

Сунушталууда: