Спектрофотометрдин жардамы менен ДНК концентрациясы кантип эсептелет?
Спектрофотометрдин жардамы менен ДНК концентрациясы кантип эсептелет?

Video: Спектрофотометрдин жардамы менен ДНК концентрациясы кантип эсептелет?

Video: Спектрофотометрдин жардамы менен ДНК концентрациясы кантип эсептелет?
Video: JUST ONE RECTANGLE - Easy bag making/ shopping bag/ Cloth bag/ Handbag/ Gym/ travel bag-COMPACT BAG 2024, Ноябрь
Anonim

ДНК концентрациясы болуп саналат тарабынан бааланат 260нмде абсорбенцияны өлчөө, А260 булгануу үчүн өлчөө ( менен өлчөнөт 320нм боюнча абсорбенция), көбөйүүдө тарабынан суюлтуу фактору жана колдонуу мамилеси А260 1,0 = 50μг/мл таза dsDNA.

Адамдар дагы сурашат, ДНКнын концентрациясын жана тазалыгын кантип табасың?

Баалоо ДНК тазалыгы , башка мүмкүн болгон булгоочу заттарды аныктоо үчүн 230нмден 320нмге чейинки абсорбентти өлчөңүз. Эң кеңири тараган тазалыкты эсептөө 260нмдеги абсорбенциянын 280нмдеги окууга бөлүнгөн катышы. Жакшы сапат ДНК А болот260280 катышы 1,7-2,0.

Ошо сыяктуу эле, жакшы ДНК концентрациясы деген эмне? А жакшы сапаты ДНК үлгү А болушу керек260280 катышы 1,7-2,0 жана А260230 катышы 1,5тен жогору, бирок бул булгоочу заттарга ар кандай техникалардын сезгичтиги ар кандай болгондуктан, бул баалуулуктар үлгүңүздүн тазалыгына көрсөтмө катары гана кабыл алынышы керек.

Буга байланыштуу, NanoDrop ДНК концентрациясын кантип эсептейт?

Сиз 260 нм абсорбенттин маанисин белгиленген коэффициентке көбөйтөсүз (бул 50 үчүн ДНК ) жана сиз аласыз ДНК концентрациясы . Voilá. (Макул, бул техникалык жактан 50гө көбөйтүлгөн 10 мм калың үлгүдөгү A260; NanoDrop A260 стандарттык кюветкадагыдай үлгү калыңдыгы 10 мм болгон сыяктуу билдирет).

Эмне үчүн биз ДНКнын санын аныктоо үчүн спектрофотометрди колдонушубуз керек эле?

А спектрофотометр болуп саналат нуклеиндик кислоталардын орточо концентрациясын аныктоого жөндөмдүү ДНК же аралашмада болгон РНК, ошондой эле алардын тазалыгы. Колдонуу Пиво-Ламберт мыйзамы болуп саналат сиңирилген жарыктын көлөмүн жутуучу молекуланын концентрациясына байланыштыруу мүмкүн.

Сунушталууда: