Эмне үчүн нитроцеллюлоза мембранасы Southern blotting колдонулат?
Эмне үчүн нитроцеллюлоза мембранасы Southern blotting колдонулат?

Video: Эмне үчүн нитроцеллюлоза мембранасы Southern blotting колдонулат?

Video: Эмне үчүн нитроцеллюлоза мембранасы Southern blotting колдонулат?
Video: Эмне үчүн китеп окуу керек? (Сиз билбеген пайдалар) 2024, Май
Anonim

Баштапкы протоколдо нитроцеллюлоза мембранасы болгон колдонулган үчүн тазалоо учурда Түштүк так бирок акыркы убактарда нейлон мембраналар үчүн ишке ашырылган тазалоо Бул процесс ДНКнын көбүрөөк көлөмүн эффективдүү байланыштыра алат Түштүк так аз сумма менен ишке ашырылууга тийиш

Демек, эмне үчүн нитроцеллюлоза мембранасы блотингде колдонулат?

Нитроцеллюлоза мембраналары популярдуу матрица болуп саналат колдонулган протеинде тазалоо алардын протеин менен байланыштыруучу жогорку жакындыгынан, ар кандай аныктоо методдору менен шайкештигинен (хамилюминесценция, хромогендик жана флуоресценция) жана белокторду, гликопротеиндерди же нуклеиндик кислоталарды кыймылсыздандыруу жөндөмдүүлүгүнөн.

Ошондой эле, эмне үчүн ДНК нейлон кабыкчасына өткөрүлүп берилет? катары 0,4 М NaOH колдонуу менен өткөрүп берүү эриткич, гелди кислотада алдын ала кыскача тазалоодон кийин, ДНК учурунда депуринацияланат өткөрүп берүү . Ns ДНК гелде же андан кийин ультрафиолет нуруна өткөрүп берүү чейин нейлон мембранасы , анын гибриддештирүү жөндөмдүүлүгүн төмөндөтөт.

Кошумчалай кетсек, Southern Blotting максаты эмнеде?

А Түштүк так ДНК үлгүлөрүндөгү белгилүү бир ДНК ырааттуулугун аныктоо үчүн молекулярдык биологияда колдонулган ыкма. Southern blotting электрофорез менен бөлүнгөн ДНК фрагменттерин чыпкалуу мембранага өткөрүп берүүнү жана андан кийин фрагментти зонд гибриддештирүү жолу менен аныктоону айкалыштырат.

Southern Blotting соттук изилдөөлөргө кандайча жардам берет?

А Түштүк так , анын ойлоп табуучусу Эдвиндин атынан аталган Түштүк , ДНК үлгүсүндөгү белгилүү бир ДНК тизмегинин бар-жоктугун текшерүү үчүн колдонулган ыкма. Инсандын ДНКсы белгилүү бир чектөө ферменти менен сиңирилгенден кийин, пайда болгон фрагменттерге анализ жасалат. Түштүк так талдоо.

Сунушталууда: