Мазмуну:

Гель электрофорезин кантип жүктөйсүз?
Гель электрофорезин кантип жүктөйсүз?

Video: Гель электрофорезин кантип жүктөйсүз?

Video: Гель электрофорезин кантип жүктөйсүз?
Video: Электрофорез в геле (видео 3) | Генная инженерия |Молекулярная генетика 2024, Март
Anonim

Үлгүлөрдү жүктөө жана агароза гелин иштетүү:

  1. кошуу жүктөө ДНК үлгүлөрүңүздүн ар бирине буфер.
  2. Катуу болгондон кийин агарозду кой гел ичине гел куту ( электрофорез бирдиги).
  3. Толтуруу гел чейин 1xTAE (же TBE) менен кутуча гел капталган.
  4. Абайлагыла жүктөө биринчи тилкеге молекулярдык тепкич гел .

Буга байланыштуу гель электрофорези үчүн канча ДНК жүктөө керек?

суммасы жүктөө үчүн ДНК ар бир скважина өзгөрүлмө болуп саналат. Эң аз сумма ДНК этидум бромиди менен аныктоого болот 10 нг. ДНК ар бир скважинага 100 нг чейин өлчөмдөрү этидиум бромидинде курч, таза тилкеге алып келет гел.

Кошумча, эмне үчүн буфер гелдик электрофорезде суунун ордуна колдонулат? The буфер ДНК эритмесинин рНын нейтралдуу деңгээлге жакын кармап туруу үчүн зарыл, анткени ал электролиз аркылуу кислота болуп калышы мүмкүн. электроддордон келип чыккан электр агымдары себеп болушу мүмкүн суу молекулалар Н+ иондорун диссоциациялоо жана чыгаруу.

Адамдар дагы суроо беришет, эмне үчүн гель электрофорезинде маркер колдонулат?

Кичинекей фрагменттер чоңураак фрагменттерге караганда ылдамыраак, демек, жылан аркылуу жылат гел . Эмне үчүн маркер колдонулат аркылуу үзүндүлөрдү жүргүзүүдө гел ? А маркер белгилүү өлчөмдөгү ДНК фрагменттерин камтыйт. Маркерлер ар биринде иштетилет гел башка белгисиз фрагменттери менен салыштыруу үчүн гел тилкелер.

Агароз гелинде канча ДНК көрүүгө болот?

Көпчүлүк агароз гелдери 0,7% жана 2% ортосунда түзүлөт. А 0,7% гел болот чоңдун жакшы бөлүнүшүн (резолюциясын) көрсөтүү ДНК фрагменттери (5–10 кб) жана 2% гел болот кичинекей фрагменттер үчүн (0,2–1 кб) жакшы чечимди көрсөтөт.

Сунушталууда: