Мазмуну:
Video: Гель электрофорезин кантип жүктөйсүз?
2024 Автор: Miles Stephen | [email protected]. Акыркы өзгөртүү: 2023-12-15 23:38
Үлгүлөрдү жүктөө жана агароза гелин иштетүү:
- кошуу жүктөө ДНК үлгүлөрүңүздүн ар бирине буфер.
- Катуу болгондон кийин агарозду кой гел ичине гел куту ( электрофорез бирдиги).
- Толтуруу гел чейин 1xTAE (же TBE) менен кутуча гел капталган.
- Абайлагыла жүктөө биринчи тилкеге молекулярдык тепкич гел .
Буга байланыштуу гель электрофорези үчүн канча ДНК жүктөө керек?
суммасы жүктөө үчүн ДНК ар бир скважина өзгөрүлмө болуп саналат. Эң аз сумма ДНК этидум бромиди менен аныктоого болот 10 нг. ДНК ар бир скважинага 100 нг чейин өлчөмдөрү этидиум бромидинде курч, таза тилкеге алып келет гел.
Кошумча, эмне үчүн буфер гелдик электрофорезде суунун ордуна колдонулат? The буфер ДНК эритмесинин рНын нейтралдуу деңгээлге жакын кармап туруу үчүн зарыл, анткени ал электролиз аркылуу кислота болуп калышы мүмкүн. электроддордон келип чыккан электр агымдары себеп болушу мүмкүн суу молекулалар Н+ иондорун диссоциациялоо жана чыгаруу.
Адамдар дагы суроо беришет, эмне үчүн гель электрофорезинде маркер колдонулат?
Кичинекей фрагменттер чоңураак фрагменттерге караганда ылдамыраак, демек, жылан аркылуу жылат гел . Эмне үчүн маркер колдонулат аркылуу үзүндүлөрдү жүргүзүүдө гел ? А маркер белгилүү өлчөмдөгү ДНК фрагменттерин камтыйт. Маркерлер ар биринде иштетилет гел башка белгисиз фрагменттери менен салыштыруу үчүн гел тилкелер.
Агароз гелинде канча ДНК көрүүгө болот?
Көпчүлүк агароз гелдери 0,7% жана 2% ортосунда түзүлөт. А 0,7% гел болот чоңдун жакшы бөлүнүшүн (резолюциясын) көрсөтүү ДНК фрагменттери (5–10 кб) жана 2% гел болот кичинекей фрагменттер үчүн (0,2–1 кб) жакшы чечимди көрсөтөт.
Сунушталууда:
Атомдор электрондорду кантип алып, кантип жоготот?
Иондук байланыш. Биздин чийки, концептуалдык аныктама боюнча, химиялык байланыштар атомдор арасындагы электрондордун алмашуусу же электрондорду бөлүшүү жолу менен пайда болушу мүмкүн. Атомдор электрондорун жоготкондо же алгандан кийин иондор деп аталат. Электрондордун жоголушу таза оң заряддуу атомду калтырат жана атом катион деп аталат
Колонна хроматографиясында үлгүнү кантип жүктөйсүз?
Колонканы жүктөө үчүн: Үлгүнү эриткичтин минималдуу көлөмүндө (5–10 тамчы) эритүү. Калың ийнеси бар пипетка же шприцтин жардамы менен үлгүнү түздөн-түз кремнеземдин үстүнө тамызыңыз. Үлгү толугу менен кошулгандан кийин, эриткичтин деңгээли кремнеземдин чокусуна тийгидей кылып, мамычаны агып кетүүгө мүмкүнчүлүк бериңиз
Гель электрофорезинин максаты эмне?
Негизги пункттар: Гель электрофорези ДНК фрагменттерин өлчөмүнө жараша бөлүү үчүн колдонулган ыкма. ДНК үлгүлөрү гелдин бир учундагы кудуктарга (чыгууга) жүктөлөт жана аларды гел аркылуу тартуу үчүн электр тогу колдонулат. ДНК фрагменттери терс заряддуу, ошондуктан алар оң электродду көздөй жылат
Гель электрофорези ДНК молекулаларын бөлүү үчүн кандай факторду колдонот?
Гель чоңураак молекулаларга караганда кичинекей ДНК молекулалары гелдин ичинде тезирээк өтүү мүмкүнчүлүгүнө ээ болгондуктан, ар кандай ДНК молекулаларын өлчөмүнө жараша бөлүп турган элеч сыяктуу иштейт. ДНК аркылуу өткөн гелдин курамындагы химиялык зат ДНКга байланышат жана УК жарыгында көрүнүп турат
Гель электрофорезинде оң башкаруу жана терс башкаруу деген эмне?
Оң жана терс башкаруулар гел электрофорез экспериментинин негиздүүлүгүн тастыктоо үчүн колдонулган үлгүлөр болуп саналат. Позитивдүү башкаруу - бул ДНКнын же белоктун белгилүү фрагменттерин камтыган үлгүлөр жана гелде белгилүү бир жол менен көчүрүлөт. Терс башкаруу - бул ДНК же белок камтыган үлгү