Video: ПЦР продуктуну тазалоонун максаты эмне?
2024 Автор: Miles Stephen | [email protected]. Акыркы өзгөртүү: 2023-12-15 23:38
Тазалоо ДНКнын а ПЦР реакция адатта төмөнкү агымда колдонуу үчүн зарыл жана ферменттерди, нуклеотиддерди, праймерлерди жана буфердик компоненттерди жок кылууга көмөктөшөт. Салттуу түрдө бул фенол хлороформду экстракциялоо сыяктуу органикалык экстракция ыкмаларын колдонуу менен ишке ашты, андан кийин этанолду чөктүрөт.
Ошондой эле суроо туулат, эмне үчүн ПЦР продуктуларын тазалоо керек?
Сиз керек ПЦР продуктуларын тазалоо байлоонун ийгилигин оптималдаштыруу үчүн пайдаланылбаган праймерлерден, нуклеотиддерден жана ферменттерден арылуу үчүн продукт нын ПЦР . үчүн тазалоо the ПЦР продуктулары , өлчөмдү алып салуу хроматографиясы колдонулат.
Мындан тышкары, мен ПЦРден кийин эмне кылышым керек? Максималдуу калыбына келтирүү үчүн, кармап турган чөйчөктү 10-20 мкл TE же суу менен эки жолу чайкаңыз. Акыркы ПЦР реакция молекулярдык биологиянын ар кандай колдонмолору үчүн колдонула турган күчөтүлгөн ДНКнын микрограммына чейин камтышы мүмкүн. Бул колдонмолор калдык компоненттерине аздыр-көптүр сезгич болушу мүмкүн ПЦР реакция аралашмасы.
Ошондой эле суроо бериши мүмкүн, сиз ПЦР продуктуларын кантип тазалайсыз?
Классикалык ыкмалар колдонулат таза өйдө ПЦР продуктулары секвенирлөөнүн алдында гел электрофорезин, этанолду тундурууну жана колонна хроматографиясын камтыйт. Бир топ натыйжалуу болгонуна карабастан, бул ыкмалар бир нече үлгүлөрдү параллелдүү иштетүүдө тез эле түйшүктүү болуп, ар кандай деңгээлдеги үлгү жоготууларын көрсөтүшү мүмкүн.
Эмне үчүн ДНКны тазалоо керек?
Биз таза өйдө ДНК буфердик туздарды, ферменттерди же төмөнкү агымдык колдонмолорго таасир этиши мүмкүн болгон башка заттарды алып салуу үчүн суудагы эритмелерден. Мисалдар ПЦР реакциясын камтыйт таза өйдө, таза чектөө дайджест кийин чейин жана таза геномдук же плазмидден турат ДНК клеткалык белоктор/ сыныктар менен булганган.
Сунушталууда:
Genesis космос кемесинин максаты эмне?
Башталыш күн шамалы бөлүкчөлөрүнүн үлгүсүн чогултуп, анализ үчүн Жерге кайтарып берген NASA үлгүсүн кайтаруучу зонд болгон. Бул Аполлон программасынан кийин материалды кайтарып берген НАСАнын үлгүлөрдү кайтаруу боюнча биринчи миссиясы жана Айдын орбитасынан тышкары материалды кайтарган биринчи миссиясы болду
Кюветаларды тазалоонун туура жол-жобосу кандай?
Колдонуудан мурун кюветтерди ар кандай топтолгон калдыктарды тазалоо үчүн тазалоо керек. Эгерде кюветалар таза болуп көрүнсө, жөн гана бир нече жолу дистилденген суу менен, анан ацетон менен бир жолу чайкаңыз (суу белгилерин болтурбоо үчүн) жана колдонуудан мурун тескери абалда (мисалы, салфеткада) кургатуу үчүн калтырыңыз
ПЦР өнүмдөрүн тазалоонун башка ыкмалары барбы?
ПТРди тазалоону же ПТР натыйжаларын валидациялоону талап кылган колдонмолор үчүн жалпысынан эки ыкма колдонулат: колонканы колдонуу менен ПТР продуктусун изоляциялоо жана агароз гелинен гелди тазалоо
ПЦР цикли деген эмне?
Полимераздык чынжыр реакциясы же ПТР - бул белгилүү бир ДНК аймагынын көптөгөн көчүрмөлөрүн in vitro (организмде эмес, пробиркада) жасоо ыкмасы. ПТРде реакция бир катар температуралык өзгөрүүлөр аркылуу кайра-кайра айланып өтөт, бул максаттуу аймактын көптөгөн көчүрмөлөрүн түзүүгө мүмкүндүк берет
Эмне үчүн ПЦР маанилүү?
Полимераздык чынжыр реакциясы (ПТР) көптөгөн колдонмолор үчүн маанилүү курал болуп саналат. Мисалы, аны талдоо үчүн жетишсиз болгондо (мисалы, кылмыш болгон жерден ДНК үлгүсү, археологиялык үлгүлөр), кызыккан генди аныктоо ыкмасы катары же ДНКнын үлгүсүн көбөйтүү үчүн колдонсо болот. оору