Мазмуну:

Абсорбенциядан ДНКнын концентрациясын кантип табасыз?
Абсорбенциядан ДНКнын концентрациясын кантип табасыз?
Anonim

ДНК концентрациясы өлчөө менен бааланат абсорбенция 260 нмде, А260 булгануу үчүн өлчөө (өлчөнгөн абсорбенция 320 нм), суюлтуу коэффициентине көбөйтүп, А260 1,0 = 50μг/мл таза dsDNA.

Ошо сыяктуу эле, адамдар ДНКнын концентрациясын кантип табасыңар?

Баштапкы үлгүдөгү ДНКнын концентрациясын аныктоо үчүн төмөнкүдөй эсептөөлөрдү жүргүзүңүз:

  1. dsDNA концентрациясы = 50 мкг/мл × OD260 × суюлтуу фактору.
  2. dsDNA концентрациясы = 50 мкг/мл × 0,65 × 50.
  3. dsDNA концентрациясы = 1,63 мг/мл.

Ошондой эле, жакшы ДНК концентрациясы деген эмне? А жакшы сапаты ДНК үлгү А болушу керек260280 катышы 1,7-2,0 жана А260230 катышы 1,5тен жогору, бирок бул булгоочу заттарга ар кандай техникалардын сезгичтиги ар кандай болгондуктан, бул баалуулуктар үлгүңүздүн тазалыгына көрсөтмө катары гана кабыл алынышы керек.

Ушундай жол менен ДНК 280 нмде сиңиреби?

Абсорбенттин катышы 260 nm vs 280 нм баалоо үчүн көбүнчө колдонулат ДНК белок эритмелеринин булганышы, анткени белоктор (атап айтканда, жыпар жыттуу аминокислоталар) сиңирүү жарык саат 280 нм.

ДНК топтоо үчүн NanoDrop кантип колдоносуз?

Негизинен нанодроп тандоо мүмкүнчүлүгүн берет ДНК , РНК, Белоктор. Сиз тандоо керек ДНК , андан кийин 2 Μл сууну (милли Q артык) салыңыз, андан кийин өлчөм 0 экенин ырастоо үчүн "Бош" дегенди тандаңыз. Андан кийин 2 ΜL үлгүңүздү салыңыз. Сиз өлчөө аласыз.

Сунушталууда: