Мазмуну:

Northern Blot тести эмне үчүн колдонулат?
Northern Blot тести эмне үчүн колдонулат?

Video: Northern Blot тести эмне үчүн колдонулат?

Video: Northern Blot тести эмне үчүн колдонулат?
Video: Что может таблетка для посудомоечной машины/Бытовые советы 2024, Ноябрь
Anonim

The түндүк так , же РНК так , техника болуп саналат колдонулган үлгүдөгү РНКны (же изоляцияланган мРНКны) аныктоо аркылуу ген экспрессиясын изилдөө үчүн молекулярдык биология изилдөөсүндө.

Ошо сыяктуу эле, бир суроо болушу мүмкүн, Northern Blot эмнени аныктайт?

А түндүк так үчүн колдонулган лабораториялык ыкма болуп саналат аныктоо РНК аралашмасынын арасында белгилүү РНК молекулалары. Түндүк тазалоо белгилүү гендердин РНК экспрессиясын өлчөө үчүн белгилүү бир кыртыштан же клетка түрүнөн РНК үлгүсүн талдоо үчүн колдонулушу мүмкүн.

Андан кийин суроо туулат, Түштүк жана Түндүк блоттинг деген эмне? Түштүк жана Түндүк даана гибриддештирүү. Түштүк так гибриддештирүү гел электрофорези менен бөлүнгөн белгилүү ДНК фрагменттерин аныктоону билдирет (1-сүрөт). ылайыкташтырылган Southern blotting болуп саналат Түндүк тазалоо , анда РНК молекулалары ДНКнын ордуна гел аркылуу электрофорезделет.

Андан тышкары, Түндүк тагы кантип жасайсыз?

Түндүк талдоо катышкан кадамдар төмөнкүлөрдү камтыйт:

  1. РНК изоляциясы (жалпы же поли(А) РНК)
  2. Зонд муун.
  3. Денатурациялоочу агароз гелинин электрофорези.
  4. Катуу колдоо жана иммобилизацияга өтүү.
  5. Прегибриддөө жана зонд менен гибриддештирүү.
  6. Жуу.
  7. аныктоо.
  8. Сынуу жана кайра текшерүү (милдеттүү эмес)

Түштүк тагы сага эмне дейт?

Southern blotting кан же кыртыш үлгүсүндөгү белгилүү бир ДНК ырааттуулугун аныктоо үчүн колдонулган лабораториялык ыкма. Рестриктаза ферменти ДНКнын үлгүсүн гел электрофорезинин жардамы менен бөлүнгөн фрагменттерге кесүү үчүн колдонулат. ДНК фрагменттери гелден мембрананын бетине көчүрүлөт.

Сунушталууда: